研究摘要
[1] 轮状病毒 (Rotavirus,RV)是急性腹泻中一种常见的感染源,几乎所有儿童在5岁以前都受到过轮状病毒感染。据统计,全球每年约有1 .11?1 .35亿例轮状病毒腹泻病例,导致数十万名婴儿死亡。
[2] 本发明的目的在于提供动物双歧杆菌乳亚种BLa80在制备抗轮状病毒感染致腹泻的药物或食物中的应用。所述动物双歧杆菌乳亚种BLa80在体外能抑制轮状病毒对细胞的侵染和增殖,可以有效缓解轮状病毒感染导致的腹泻症状。
菌株功能研究
体外试验表明动物双歧杆菌乳亚种BLa80菌悬液可抑制轮状病毒对FHs74Int细胞的感染
在体外培育FHs74Int细胞于培养皿中,准备100TCID50/0.1mL轮状病毒进行感染,分预处理组、接入组、干预组、病毒感染组、正常细胞组进行对照,病毒感染组细胞CPE达到80%以上时,用MTT法测定细胞活性,根据公式计算病毒感染抑制率实验结果如图1所示。
三组BLa80处理组均对轮状病毒有抑制作用,其中第1组的抑制率为25 .9%,第2组的抑制率为15 .5%,第3组的抑制率为20 .7%,表明BLa80预处理组对轮状病毒的抑制作用更强。
动物实验表明动物双歧杆菌乳亚种BLa80菌悬液能改善感染轮状病毒乳鼠的生存情况
针对轮状病毒对哺乳动物的感染导致腹泻等病理情况,微康益生菌开展了一项乳鼠感染轮状病毒试验,使用BLa80菌悬液对乳鼠采用空白对照组、病毒对照组、灌服BLa80菌悬液组、灌服人轮状病毒组、灌服人轮状病毒和BLa80菌悬液组、灌服BLa80菌悬液组进行持续6日接受一次定量经口灌服干预。记录不同处理组别间(15只/组)乳鼠的腹泻、死亡以及HRV抗原情况(阳性反应病毒感染),得到实验结果。
由上表数据可知,正常对照组乳鼠全过程未见腹泻,无死亡;轮状病毒感染组腹泻率达100%,死亡率为53.0% ;预防组的乳鼠腹泻数仅3只,至第10天死亡率为13.3%;治疗组的乳鼠腹泻数为5只,至第10天死亡率为20%。与轮状病毒感染组相比,动物双歧杆菌乳亚种BLa80预防组和治疗组的腹泻持续天数及HRV阳性天数明显缩短 (P<0 .01)。
轮状病毒感染小鼠模型血清检测表明动物双歧杆菌乳亚种BLa80干预有助于降低炎症因子水平并提升免疫应答
由图2数据可知,轮状病毒感染组与正常对照组血清中TNF-α含量存在显著差异(P<0 .01),经干预后,BLa80预防组和治疗组中血清的 TNF -α含量均恢复至正常水平,表明BLa80的干预降低了炎症因子的水平。
由图3数据可知,正常对照组、轮状病毒感染组与BLa80预防组和治疗组之间存在极显著差异(P<0 .01),BLa80预防组血清中IFN-γ含量明显高于正常对照组和BLa80治疗组血清中IFN-γ的含量,表明BLa80预防组对轮状病毒的免疫应答效果更好。
研究结论
综上所述,本发明所涉及的动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacterium animalis subsp .lactis)BLa80耐受性良好,具有优良的抗轮状病毒感染作用,能够对轮状病毒感染的乳鼠表新出较好的保护作用,降低了感染乳鼠的腹泻天数、死亡率和血清中的促炎因子水平,将该菌种用于制备抗轮状病毒感染致腹泻的药物或食物,对有效预防和缓解轮状病毒引起的腹泻症状具有重要意义。